點滴透析綜述

點滴透析的定義：

    DNA溶液制備以后，在操作過程使用的酶或許被使用的化學品的殘留多影響。這或許包括過量的鹽，SDS, 或者其他抑制物質。為了恰當的使用DNA制備液的結果, 有時需要進行點滴透析。理想情況下，點滴透析能夠漂洗酶，去除殘留，提供更好和更加準確地結果。

點滴透析的過程：

  在點滴透析的過程中，緩沖液加到燒杯，培養板，或其他容器中。常用的緩沖液是雙蒸水。 一個VS型膜放到緩沖液上面并且光面朝上，這個濾膜會被*飽和，這個過程大概持續5分鐘。同時，很重要看下濾膜是否有氣泡，這些氣泡會在濾膜和緩沖液之間。DNA通過移液器緩慢滴落到濾膜的中心處。如果DNA保持在濾膜的中間，整個的測試樣品可以放在上面。如果DNA發生了移動，那么這個DNA不適合透析。DNA不會保持在濾膜的中心或許需要一個額外的酒精沉淀步驟。

這個容器然后蓋上約1-4個小時。等待合適的時間之后，DNA使用另外一個移液器進行重新收集，然后放入一個微量離心管中，用緩沖液將膜進行漂洗。分光光度計或瓊脂糖凝膠電泳用來估計DNA的濃度。這時，有可能影響DNA分析結果的化學物質應該被去除。 

盡管點滴透析可以通過其他緩沖液來進行操作，通常來說推薦雙蒸水。點滴透析的過程也可以使用一個樣本進行重復如果你發現仍然有沒有必要的殘留或污染物的話. 當重復點滴透析的過程時，使用新鮮的緩沖液和新的濾膜很重要 -- 然而樣品可以需要操作所需要的額外時間. 

點滴透析的難點：

  點滴透析需要具備一定手工操作水平的熟練性, 因為它不像化學反應這么簡單 -- 它需要操作人員能夠將濾膜正確的放置，并且能夠準確地將DNA滴到膜上. 如果DNA沒有準確地滴到濾膜中心或者濾膜丟失, 這個過程或許需要重新開始. 進一步來說，濾膜或許會翻轉。

  因為濾膜會在緩沖液上不可預測的移動, 強烈推薦操作人員先模擬整個操作過程在用真實的樣品操作之前。一旦這個過程被掌握后，就比較簡單了，只要你理解了各個組分如何整體產生效果。新手進行操作時需要緩慢的加DNA, 這樣當組分發生突然移動時可以做出反應。

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