BD 558049 裂解/固定緩沖液 現(xiàn)貨折扣

產(chǎn)品名稱：BD 558049 裂解/固定緩沖液 現(xiàn)貨折扣

產(chǎn)品貨號：558049

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產(chǎn)品介紹：

BD Phosflow™ 裂解/固定緩沖液旨在用于裂解和固定全血，用于細(xì)胞內(nèi)流式細(xì)胞術(shù)。例如，在用激酶激活劑（如佛波醇酯）刺激細(xì)胞后，BD Phosflow™ 裂解/固定緩沖液可用于一步裂解紅細(xì)胞和固定白細(xì)胞。這使研究人員能夠快速使激酶、磷酸酶和/或蛋白酶失活，從而可以檢查細(xì)胞的體內(nèi)磷酸化狀態(tài)。BD Phosflow™ 裂解/固定緩沖液可保持細(xì)胞的光散射特性，可用于人和小鼠全血。在制備用于淋巴細(xì)胞亞群分析的 PBMC 時(shí)，全血裂解已被證明與密度梯度離心一樣有效。在許多情況下，磷酸化特異性抗體可與細(xì)胞表面標(biāo)記物（如 CD 標(biāo)記物）染色同時(shí)使用。然而，并非所有細(xì)胞表面標(biāo)記都與 BD Phosflow™ 裂解/固定緩沖液兼容。

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產(chǎn)品用途：用于裂解和固定全血，用于細(xì)胞內(nèi)流式細(xì)胞術(shù)

推薦實(shí)驗(yàn)流程：

流式細(xì)胞儀:

1.   收集存在EDTA或肝素的正常人體血液，并在適用的情況下使用適當(dāng)?shù)幕罨瘎┻M(jìn)行處理。

2.   用去離子水或蒸餾水(室溫)稀釋所需量的BD Phosflow™Lyse/Fix Buffer (5X濃縮液)1:5，然后將溶液預(yù)熱至37°C。每次實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)將1X工作溶液制成新鮮溶液，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)應(yīng)丟棄任何剩余溶液。

3.將一卷血液與20卷預(yù)熱的BD Phosflow™Lyse/Fix Buffer (1X)混合。通過大力翻轉(zhuǎn)試管8-10次混合均勻，然后將試管在37°C的水浴中孵育10分鐘。

4.   在臺(tái)式離心機(jī)中以500x g的速度將細(xì)胞旋轉(zhuǎn)8分鐘，吸出上清液，用Hank's溶液清洗細(xì)胞一次。

5.   通過加入適當(dāng)?shù)臐B透試劑，如冷BD Phosflow™Perm Buffer II，緩慢地旋轉(zhuǎn)，使細(xì)胞松弛并滲透細(xì)胞。在冰上孵育30分鐘，然后旋轉(zhuǎn)細(xì)胞。

6.   清洗細(xì)胞兩次，用BD Pharmingen™染色緩沖液重懸。

7.   用合適的抗體在室溫下染色30-60分鐘，清洗后準(zhǔn)備流式細(xì)胞儀分析。

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產(chǎn)品貨號：558049

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