TAKARA 載體克隆試劑盒 pMD 19-T 載體

產品名稱：TAKARA 載體克隆試劑盒 pMD 19-T 載體

產品貨號：6013

產品品牌：takara寶日醫

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產品信息：

· 品牌: Takara

· 貨號: 6013

· 規格: 20 反應

pMD 19-T Vector是一種高效克隆PCR產物 (TA Cloning) 的專用載體。本載體由pUC19載體改建而成，在pUC19載體的多克隆位點處的Xba I 和Sal I 識別位點之間插入了EcoR V 識別位點，用EcoR V 進行酶切反應后，再在兩側的3′端添加 “T" 而成。因大部分耐熱性DNA聚合酶進行PCR反應時都有在PCR 產物的3′末端添加一個 “A" 的特性，所以使用本制品可以大大提高PCR產物的連接、克隆效率。
由于本載體以pUC19載體為基礎構建而成，所以它具有同pUC19載體相同的功能。此外，本制品中的高效連接液Solution I 可以在短時間內 (約30分鐘) 完成連接反應，其連接液可以直接用于細菌轉化，大大方便了實驗操作。本制品中的Control Insert (500 bp) 還可以用于Control反應。
本載體與pMD 18-T Vector 相比，本制品的β-半乳糖苷酶的表達活性更高，菌落顯示藍色的時間縮短，菌落顯示的藍色更深。因此，克隆后更容易進行克隆體的藍白篩選。

產品名稱：克隆用T載體pMD™19-T Vector Cloning Kit

產品貨號：6013

產品品牌：takara寶日醫

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1. Solution I 請于冰中融解。
2. 克隆時使用的Insert DNA片段 (PCR產物) 建議進行切膠回收純化，否則PCR產物中的短片段DNA (甚至是電泳也無法確認的非特異性小片段)、殘存引物等雜質都會影響TA克隆效率。
3. 按照本實驗操作進行連接后，直接進行轉化時的連接液不要超過20 μl。當要轉化的DNA量較大或準備進行電轉化時，需對連接液進行乙醇沉淀，純化DNA后再進行轉化。進行乙醇沉淀時使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 連接反應請在25℃以下進行，溫度升高 (>26℃) 較難形成環狀DNA。連接效率偏低時，可適當延長連接反應時間至數小時。
5. 本制品來源于pUC19載體，因此，適合pUC19載體的感受態細胞都可以使用，如：JM109等。

pMD 19-T Vector的結構

1. Solution I 請于冰中融解。
2. 克隆時使用的Insert DNA片段 (PCR產物) 建議進行切膠回收純化，否則PCR產物中的短片段DNA (甚至是電泳也無法確認的非特異性小片段)、殘存引物等雜質都會影響TA克隆效率。
3. 按照本實驗操作進行連接后，直接進行轉化時的連接液不要超過20 μl。當要轉化的DNA量較大或準備進行電轉化時，需對連接液進行乙醇沉淀，純化DNA后再進行轉化。進行乙醇沉淀時使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 連接反應請在25℃以下進行，溫度升高 (>26℃) 較難形成環狀DNA。連接效率偏低時，可適當延長連接反應時間至數小時。

5. 本制品來源于pUC19載體，因此，適合pUC19載體的感受態細胞都可以使用，如：JM109等。

產品名稱：TAKARA 載體克隆試劑盒 pMD 19-T 載體

產品貨號：6013

產品品牌：takara寶日醫

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