產(chǎn)品名稱：康為世紀(jì) 無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒 現(xiàn)貨折扣

產(chǎn)品貨號：CW2105S

現(xiàn)貨折扣：康為世紀(jì)無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒（EndoFree Plasmid Midi Kit），歡迎聯(lián)系華雅思創(chuàng)生物咨詢購買

產(chǎn)品介紹：

本產(chǎn)品采用獨·特的硅基質(zhì)膜吸附技術(shù)，在堿裂解法裂解細(xì)胞的基礎(chǔ)上，高效專一的結(jié)合質(zhì)粒DNA。每次可處理5-15 mL菌液，獲得多至100 μg轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒DNA。使用特殊的去內(nèi)毒素buffer ER，有效的去除內(nèi)毒素、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。產(chǎn)品內(nèi)另配備特殊指示劑CWBlue，保障質(zhì)粒提取高效完成。

產(chǎn)品特點：

? 操作準(zhǔn)確：加入顏色指示劑，保證操作的準(zhǔn)確性，得到純度高、質(zhì)量穩(wěn)定的質(zhì)粒。

? 提取得率高：適用于5-15mL菌液，質(zhì)粒得率可多至100μg，提高實驗效率。

? 無內(nèi)毒素：采用特殊的緩沖液系統(tǒng)和去內(nèi)毒素Buffer，可獲得轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒。

? 適用范圍廣：適用于各種大小和高低拷貝數(shù)的目的質(zhì)粒。

實驗案例：

1. 適用于高拷貝/低拷貝質(zhì)粒提取

【實驗一】使用康為世紀(jì)無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒(CW2105)分別取7.5mL/15mL菌液提取高拷貝（p13）及低拷貝（PEGX）質(zhì)粒，結(jié)果如下：

實驗結(jié)果表明：康為世紀(jì)無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒(CW2105)應(yīng)用范圍廣，適用于高拷貝/低拷貝質(zhì)粒提取，得到的質(zhì)粒純度高，完整性好。

產(chǎn)品名稱：康為世紀(jì) 無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒 現(xiàn)貨

產(chǎn)品貨號：CW2105S

額外試劑要求：

無水乙醇，異丙醇。

產(chǎn)品組分：

實驗前準(zhǔn)備：

1．所有組分可在干燥、室溫（15-30℃）環(huán)境穩(wěn)定保存1年，更長時間保存可置于2-8℃，加入RNase A的Buffer P1 置于2-8℃可穩(wěn)定保存6個月。

2．第一次使用前，將RNase A溶液全部加入到Buffer P1中，混勻，置于2–8℃保存，使用前需在室溫中放置一段時間，恢復(fù)至室溫后使用。

3．第一次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在Buffer PW中加入無水乙醇。

4．使用前請先檢查Buffer P2 和Buffer E3是否出現(xiàn)結(jié)晶或沉淀，如有結(jié)晶或沉淀現(xiàn)象，可在37℃水浴幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。

5．注意不要直接接觸Buffer P2和Buffer E3，使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。

6．提取質(zhì)粒的量和純度與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、菌株種類、質(zhì)粒大小、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。

使用說明：

1．取5-15 ml過夜培養(yǎng)的菌液，加入離心管（自備）中，13,000 rpm（~16,200×g）離心1分鐘收集細(xì)菌，盡量吸棄全部上清。

2．向留有菌體沉淀的離心管中加入500 μl Buffer P1（請先檢查是否已加入RNase A），使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻，懸浮細(xì)菌沉淀。

3．向離心管中加入500 μl Buffer P2，溫和地上下顛倒混勻8-10次，使菌體充分裂解，室溫放置3-5分鐘。此時溶液應(yīng)變得清亮粘稠。

4．向離心管中加入500 μl Buffer E3，立即上下顛倒混勻8-10次，此時出現(xiàn)白色絮狀沉淀，室溫放置5分鐘。13,000 rpm離心5分鐘，吸取上清，將上清加入過濾柱（Endo-RemoverFM）中（已裝入收集管），13,000 rpm離心1分鐘過濾，將收集管中的濾液轉(zhuǎn)移到離心管（自備）中。

5．向濾液中加入450 μl異丙醇，上下顛倒混勻。

6．柱平衡：向已裝入收集管的吸附柱（Spin Columns DL）中加入200 μl Buffer PS，13,000 rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。

7．將步驟5中濾液與異丙醇的混合溶液轉(zhuǎn)移到平衡好的吸附柱（已裝入收集管）中。

8．13,000 rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。

9．向吸附柱中加入750 μl Buffer PW（請先檢查是否已加入無水乙醇），13,000 rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液。

10.將吸附柱重新放回收集管中，13,000 rpm離心1分鐘。

11.將吸附柱置于一個新的離心管（自備）中，向吸附膜的中間部位加入100-200 μl Endo-Free Buffer EB，室溫放置2-5分鐘，13,000rpm離心2分鐘。-20℃保存質(zhì)粒。

保存條件：室溫（15-30℃）

產(chǎn)品訂購信息：

品牌             貨號             名稱                                     規(guī)格

康為世紀(jì)  CW2105S  EndoFree Plasmid Midi Kit     50 preps

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