關于鱟試劑的實驗方法你了解多少？

　　因此，科學家認為血液呈淡藍色的鱟在醫學研究中有*作用。用鱟血制成試劑，再滴入注射液，若試劑立即凝固或變色，就說明注射液內含有使人發熱、休克甚至死亡的細菌內毒素。

　　此外，鱟為國家二級保護動物，我們呼吁政府和民間共同加強該“活化石”生物的保護。

　　鱟試劑是從棲生于海洋的節肢動物“鱟”的藍色血液中提取變形細胞溶解物，經低溫冷凍干燥而成的生物試劑，專用于細菌內毒素檢測和真菌（1,3)-β-D-葡聚糖檢測。

　　鱟試驗法是國際上檢測內毒素好的方法，它簡單﹑快速﹑靈敏﹑準確，因而被歐美藥典及我國藥典定為法定內毒素檢查法，并已被世界各國所采用。能生產鱟試劑的主要有美國、日本、中國等國家。

　　實驗方法：

　　鱟試劑按實驗方法可分為：凝膠法、動態濁度法鱟試劑、終點濁度法鱟試劑、動態顯色法鱟試劑、終點顯色法鱟試劑。

　　凝膠法系通過鱟試劑與內毒素產生凝集反應的原理來定性檢測或半定量內毒素的方法。凝膠法是通過觀察有無凝膠形成作為反應的終點。此法操作比較簡單，經濟，不需要專用測定設備，可以進行定性或半定量測定。

　　凝膠法鱟試劑常見規格為0.1ml/支或0.2ml/支的單個測試或0.5ml/支至5.2ml/瓶的真空封口西林瓶裝的多個測試。使用時一般應加細菌內毒素檢查用水復溶后使用。

　　特異性鱟試劑，即棄G因子鱟試劑，國內的產品，它專一對內毒素起反應，避免了G因子旁路的干擾，使檢測結果更加可靠，在藥檢和臨床檢驗方面是*的理想檢測試劑。

　　動態濁度法鱟試劑、終點濁度法鱟試劑、動態顯色法鱟試劑、終點顯色法鱟試劑，這四種方法都是定量檢測內毒素的。這幾種定量法鱟試劑統稱光度法鱟試劑。

　　根據檢測原理，終點濁度法和動態濁度法都屬于濁度法。濁度法系利用檢測鱟試劑與內毒素反應過程中的濁度變化而測定內毒素含量的方法。終點濁度法未見商品化產品。動態濁度法（又稱動態比濁法）是檢測反應混合物的濁度上升某一預先設定的吸光度所需要的反應時間，或是檢測濁度增加速度的方法。

　　動態濁度法的特點為：1. 能準確定量。2.檢測范圍寬，可達4個數量級。3.靈敏度高達0.005EU/ml。4. 操作簡便，系統自動檢測分析，一步即成。5. 經濟實用，試劑樣品需要量少，可降至50μL。6. 和微生物檢測系統Elx808（配套IU）及專用軟件TALgent使用，一次可同時檢測多達96個樣品。

　　終點顯色法和動態顯色法都是屬于顯色基質法。顯色基質法系利用鱟試劑與內毒素反應過程中產生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團的多少而測定內毒素含量的方法，根據產物顏色判斷內毒素濃度，又稱為比色法。顯色基質法由于不依賴凝固蛋白形成凝膠，抗干擾能力強，特別適用于生物制品（蛋白、疫苗等）和臨床樣品（黃疸、血液、尿液）的細菌內毒素檢測。

　　終點顯色法是反應時間最短的鱟試驗法，只需要16分鐘就能得出結果。而且可以偶氮化染色劑，避開某些有色檢品自身顏色對鱟試驗的干擾。終點顯色法不需要特殊的檢測儀器就能準確定量。

　　動態顯色法鱟試劑兼有動態濁度法和終點顯色法鱟試劑的優點，抗干擾能力強，使用簡單方便，檢測范圍寬，靈敏度高達0.005EU/ml, 是世界上好的鱟試劑。但是價格較高。

　　如果您僅需要檢測樣品的內毒素*，可以選擇凝膠法鱟試劑，通過確定內毒素限值及最大有效稀釋倍數，做樣品的干擾試驗從而確定使用的鱟試劑的靈敏度。如果您需要定量測定樣品中內毒素含量則應選擇顯色基質鱟試劑盒或動態濁度法鱟試劑。日常檢測量不大時，可以選擇終點顯色法鱟試劑，用普通的分光光度計就可完成實驗。如果您檢測的樣品是生物制品、疫苗、血液制品等最好選用終點顯色法鱟試劑或動態顯色法鱟試劑。如果您日常的檢測量比較大，檢測的樣品對鱟試劑的干擾不大，可選用動態濁度法鱟試劑。動態濁度法鱟試劑特別適用于制藥企業對產品生產過程中的內毒素水平的監控。動態濁度法與動態顯色法需要帶溫育系統的動態光度測定儀器及配套軟件。微生物檢測系統El808（配套IU）適用于所有的定量法鱟試驗。