關(guān)于鱟試劑的實驗方法你了解多少？

　　因此，科學(xué)家認(rèn)為血液呈淡藍(lán)色的鱟在醫(yī)學(xué)研究中有*作用。用鱟血制成試劑，再滴入注射液，若試劑立即凝固或變色，就說明注射液內(nèi)含有使人發(fā)熱、休克甚至死亡的細(xì)菌內(nèi)毒素。

　　此外，鱟為國家二級保護(hù)動物，我們呼吁政府和民間共同加強(qiáng)該“活化石”生物的保護(hù)。

　　鱟試劑是從棲生于海洋的節(jié)肢動物“鱟”的藍(lán)色血液中提取變形細(xì)胞溶解物，經(jīng)低溫冷凍干燥而成的生物試劑，專用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢測和真菌（1,3)-β-D-葡聚糖檢測。

　　鱟試驗法是國際上檢測內(nèi)毒素好的方法，它簡單﹑快速﹑靈敏﹑準(zhǔn)確，因而被歐美藥典及我國藥典定為法定內(nèi)毒素檢查法，并已被世界各國所采用。能生產(chǎn)鱟試劑的主要有美國、日本、中國等國家。

　　實驗方法：

　　鱟試劑按實驗方法可分為：凝膠法、動態(tài)濁度法鱟試劑、終點濁度法鱟試劑、動態(tài)顯色法鱟試劑、終點顯色法鱟試劑。

　　凝膠法系通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來定性檢測或半定量內(nèi)毒素的方法。凝膠法是通過觀察有無凝膠形成作為反應(yīng)的終點。此法操作比較簡單，經(jīng)濟(jì)，不需要專用測定設(shè)備，可以進(jìn)行定性或半定量測定。

　　凝膠法鱟試劑常見規(guī)格為0.1ml/支或0.2ml/支的單個測試或0.5ml/支至5.2ml/瓶的真空封口西林瓶裝的多個測試。使用時一般應(yīng)加細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水復(fù)溶后使用。

　　特異性鱟試劑，即棄G因子鱟試劑，國內(nèi)的產(chǎn)品，它專一對內(nèi)毒素起反應(yīng)，避免了G因子旁路的干擾，使檢測結(jié)果更加可靠，在藥檢和臨床檢驗方面是*的理想檢測試劑。

　　動態(tài)濁度法鱟試劑、終點濁度法鱟試劑、動態(tài)顯色法鱟試劑、終點顯色法鱟試劑，這四種方法都是定量檢測內(nèi)毒素的。這幾種定量法鱟試劑統(tǒng)稱光度法鱟試劑。

　　根據(jù)檢測原理，終點濁度法和動態(tài)濁度法都屬于濁度法。濁度法系利用檢測鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中的濁度變化而測定內(nèi)毒素含量的方法。終點濁度法未見商品化產(chǎn)品。動態(tài)濁度法（又稱動態(tài)比濁法）是檢測反應(yīng)混合物的濁度上升某一預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時間，或是檢測濁度增加速度的方法。

　　動態(tài)濁度法的特點為：1. 能準(zhǔn)確定量。2.檢測范圍寬，可達(dá)4個數(shù)量級。3.靈敏度高達(dá)0.005EU/ml。4. 操作簡便，系統(tǒng)自動檢測分析，一步即成。5. 經(jīng)濟(jì)實用，試劑樣品需要量少，可降至50μL。6. 和微生物檢測系統(tǒng)Elx808（配套IU）及專用軟件TALgent使用，一次可同時檢測多達(dá)96個樣品。

　　終點顯色法和動態(tài)顯色法都是屬于顯色基質(zhì)法。顯色基質(zhì)法系利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團(tuán)的多少而測定內(nèi)毒素含量的方法，根據(jù)產(chǎn)物顏色判斷內(nèi)毒素濃度，又稱為比色法。顯色基質(zhì)法由于不依賴凝固蛋白形成凝膠，抗干擾能力強(qiáng)，特別適用于生物制品（蛋白、疫苗等）和臨床樣品（黃疸、血液、尿液）的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測。

　　終點顯色法是反應(yīng)時間最短的鱟試驗法，只需要16分鐘就能得出結(jié)果。而且可以偶氮化染色劑，避開某些有色檢品自身顏色對鱟試驗的干擾。終點顯色法不需要特殊的檢測儀器就能準(zhǔn)確定量。

　　動態(tài)顯色法鱟試劑兼有動態(tài)濁度法和終點顯色法鱟試劑的優(yōu)點，抗干擾能力強(qiáng)，使用簡單方便，檢測范圍寬，靈敏度高達(dá)0.005EU/ml, 是世界上好的鱟試劑。但是價格較高。

　　如果您僅需要檢測樣品的內(nèi)毒素*，可以選擇凝膠法鱟試劑，通過確定內(nèi)毒素限值及最大有效稀釋倍數(shù)，做樣品的干擾試驗從而確定使用的鱟試劑的靈敏度。如果您需要定量測定樣品中內(nèi)毒素含量則應(yīng)選擇顯色基質(zhì)鱟試劑盒或動態(tài)濁度法鱟試劑。日常檢測量不大時，可以選擇終點顯色法鱟試劑，用普通的分光光度計就可完成實驗。如果您檢測的樣品是生物制品、疫苗、血液制品等最好選用終點顯色法鱟試劑或動態(tài)顯色法鱟試劑。如果您日常的檢測量比較大，檢測的樣品對鱟試劑的干擾不大，可選用動態(tài)濁度法鱟試劑。動態(tài)濁度法鱟試劑特別適用于制藥企業(yè)對產(chǎn)品生產(chǎn)過程中的內(nèi)毒素水平的監(jiān)控。動態(tài)濁度法與動態(tài)顯色法需要帶溫育系統(tǒng)的動態(tài)光度測定儀器及配套軟件。微生物檢測系統(tǒng)El808（配套IU）適用于所有的定量法鱟試驗。