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          pcr試劑盒的使用方法

          更新時間:2022-02-11

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             PCR試劑盒原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
            使用方法:
            一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
            1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
            2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
            3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
            4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
            5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
            6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
            7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
            產品及特點:
            1. 即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
            2. 根據伴放線放線桿菌保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
            3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
            4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續污染。
            5. 產品僅用于科研本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
            運輸及保存:
            低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
            自備試劑
            DNA模板、10×ROX(根據機型決定,具體見使用方法)。
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